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當前位置:首頁   >  產品中心  >  試劑盒  >  檢測試劑盒  >  TO1005總抗氧化能力(FRAP微板法)

總抗氧化能力(FRAP微板法)

簡要描述:總抗氧化能力(FRAP微板法),雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒

  • 產品型號:TO1005
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-11-01
  • 訪  問  量:423

詳細介紹

活性氧(Reactive oxygen species, ROS)主要包括羥基自由基、超氧自由基和*。在細胞或組織的正常生理代謝過程中會

產生活性氧,同時一些環(huán)境因子例如紫外照射、環(huán)境污染等也可以誘導活性氧的產生,活性氧產生后可以導致細胞內脂、

蛋白和DNA等的氧化損傷,誘發(fā)氧化應激(Oxidative stress),繼而導致各種腫瘤、動脈粥樣硬化、風濕性關節(jié)炎、糖尿病、

肝損傷、以及中樞神經系統(tǒng)疾病等。機體中存在多種抗氧化物,包括抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶等,可以清除體內產生的

各種活性氧,以阻止活性氧誘導的氧化應激(oxidative stress)的產生;一個體系內的各種抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶的總

的水平即體現(xiàn)了該體系內的總抗氧化能力,因此測定血漿、血清、尿液、唾液等各種體液,細胞或組織等裂解液中的總抗氧化

能力具有非常重要的生物學意義。


總抗氧化能力(FRAP微板法)即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with ABTS method,

簡稱T-AOC Assay Kit,是一種采用ABTS作為顯色劑,可以對血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細胞或組織等裂解液、

植物或中草藥抽提液、或各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力進行檢測的試劑盒;ABTS法測定T-AOC的檢測原理是

在氧化劑作用下ABTS被氧化成綠色的ABTS?+,在抗氧化物存在時ABTS?+的產生被抑制,可在734nm或405nm測定ABTS?+的

吸光度即可測定并計算出樣品的總抗氧化能力。Trolox是一種維生素E的類似物,具有和維生素E相似的抗氧化能力,

可作為其它抗氧化物總抗氧化能力的參考,例如Trolox的總抗氧化能力為1,相同濃度情況下,其它物質的抗氧化能力可用其抗氧

化能力和Trolox相比的倍數來表示,該試劑盒快捷方便,加入待測樣品3~6分鐘即可進行吸光度測定,

通常10~20個樣品可以在20分鐘內檢測完畢。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。


操作步驟(僅供參考)

自備材料:

1、蒸餾水

2、電子天平、研缽或勻漿器、離心管或試管

3、低溫離心機、恒溫箱或水浴鍋、酶標儀、酶標板


操作步驟(僅供參考):

1、準備樣品∶

①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉,加入2.5ml PAL Lysis Buffer,冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿,4℃ 10000r/min

離心15~20min,留取上清液,-20℃凍存,用于苯丙氨解氨酶的檢測。

②血漿、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,-20℃凍存,用于苯丙解氨的檢測。

③細胞或組織樣品∶取恰當細胞或組織裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,4℃ 10000r/min離心15~20min,取上清液,

-20℃凍存,用于苯丙酸解氨酶的檢測。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶,可以使用蒸餾水或PAL

Lysis Buffer稀釋進行恰當的稀釋。

2、PAL加樣∶

取96孔板,按照下表設置對照孔、測定孔,溶液應按照順序依次加入,并

注意避免產生氣泡。如果樣品中的PAL活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置2平行孔,

求平均值。

加入物(μl)對照孔測定孔

蒸餾水150100

待測樣本5050

PAL Assay Buffer-50

3、PAL檢測︰

以對照孔為對照(調零),酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為   A測定0);40℃準確孵育1h,立即加入10μl PAL終止

液終止反應(備選方案),以對照孔為對照調零,酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為A測定1)。

注意︰加入PAL終止液終止反應為非必須步驟,可37℃準確孵育1h后直接以對照孔為對照調零,酶標儀立即測定290nm處測定

孔的吸光度。

注意事項∶

1、待測樣品中不能含有酶抑制劑,同時需避免反復凍融。

2、獲得上清液為PAL酶液,應盡快檢測,亦可-20°℃保存。

3、如果沒有可測定紫外區(qū)的酶標儀和酶標板,也可以使用紫外分光光度計和石英比色皿,但應注意比色杯的最小檢測體積。

4、每次檢測指標不宜過多,否則操作時間不一,有可能導致樣本間的差異。5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。




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